Purificação e utilização do heterodímero PSP-I/PSP-II como marcador de congelabilidade do sêmen suíno
DOI:
https://doi.org/10.26605/medvet-v15n3-3555Palavras-chave:
sêmen, suíno, criopreservação, marcador de congelabilidadeResumo
Este estudo teve como objetivo avaliar a ação do heterodímero PSP-I/PSP-II como marcador de congelabilidade e sua influência na proteção espermática durante a criopreservação do sêmen suíno. O sêmen de quatro varrões foi congelado na presença ou não do heterodímero. Após a descongelação, analisou-se a integridade acrossomal (sodas fluorescentes), integridade da membrana plasmática (sondas fluorescentes), a atividade mitocondrial (citoquimica) e a motilidade espermática (CASA). Para a integridade da membrana plasmática e acrossomal, o tratamento com 3,0 mg/mL de PSP-I/PSP-II apresentou uma maior porcentagem de células intactas (p<0,05). Não foi observada diferença significativa entre os tratamentos quanto a motilidade e atividade mitocondrial. A média dos tratamentos com 1,5 e 3,0 mg/mL de PSP-I/PSP-II foram numericamente superiores em relação ao controle (0 mg/mL) na avaliação da atividade mitocondrial. Conclui-se que o heterodímero foi capaz de proteger a membrana plasmática e acrossomal, aumentando o percentual de espermatozoides viáveis após a criopreservação. Desta forma, pode-se considerar esta proteína como um potencial marcador de congelabilidade do sêmen suíno.Downloads
Referências
Alonso, R.T.P. Novas tecnologias em reprodução suína. Suínos & Cia, Revista Técnica de Suinicultura, 50, 4(3): 10-20, 2009.
Arruda, R.P.; Andrade, A.F.C.; Peres, K.R.; Raphael, C.F.; Nascimento, J.E.; Celeghini, E.C.C. Biotécnicas aplicadas à avaliação do potencial de fertilidade do sêmen equino. Revista Brasileira de Reprodução Animal, 31(1): 8-16, 2007.
Barbas, J.P.; Mascarenhas, R.D. Cryopreservation of domestic animal sperm cells. Cell Tissue Bank, 10(1): 49–62, 2009.
Caballero, I.; Vazquez, J.M.; García, E.M.; Parrilla, I.; Roca, J.; Calvete, J.J.; Sanz, L.; Martíne, E.A. Major proteins of boar seminal plasma as a tool for biotechnological preservation of spermatozoa. Theriogenology, 70(8): 1352–1355, 2008.
Centurión, F.; Vázquez, J.M.; Calvete, J.J.; Roca, J.; Sanz, L.; Parrilla, I.; García, E.M.; Martínez, E.A. Influence of porcine spermadhesins on the susceptibility of boar spermatozoa to high dilution. Biology of Reproduction, 69(2): 640–646, 2003.
Desjardins, P.; Hansen, J.B.; Allen, M. Microvolume protein concentration determination using the NanoDrop 2000c spectrophotometer. Journal of Visualized Experiments, (33): 1610-1617, 2009.
Du, J.; Shen, J.; Wang, Y.; Pan, C.; Pang, W.; Diao, H.; Dong, W. Boar seminal plasma exosomes maintain sperm function by infiltrating into the sperm membrane. Oncotarget, 7(37): 58832–58847, 2016.
Eriksson, B.M.; Petersson, H.; Rodriguez-Martinez, H. Field fertility with exported boar semen frozen in the new flatpack container. Theriogenology, 58(6): 1065–1079, 2002.
Garcia, E.M.; Vázquez, J.M.; Calvete, J.J.; Sanz, L.; Caballero, I.; Parrilla, I.; Gil, M.A.; Roca, J.; Martinez, E.A. Dissecting the protective effect of the seminal plasma spermadhesin PSP-I/PSP-II on boar sperm functionality. Journal of Andrology, 27(3): 434-443, 2006.
Guimarães, D.B.; Barros, T.B.; Van Tilburg, M.F.; Martins, J.A.M.; Moura, A.A.; Moreno, F.B.; Monteiro-Moreira, A.C.; Moreira, R.A.; Toniolli, R. Sperm membrane proteins associated with the boar semen cryopreservation. Animal Reproduction Science, 183:27-38, 2017.
Guimarães, D.B.; Barros, T.B.; Cantanhêde, L.F.; Feugang, J.M.N.; Souza, L.P.; Tonio li, R. Qualidade espermática durante a curva de resfriamento do sêmen suíno diluído em água de coco em pó visando sua criopreservação. Ciência Animal Brasileira, 19: 1-16, 2018.
Hrudka, F. Cytochemical and ultracytochemical demonstration of cytochrome-c oxidase in spermatozoa and dynamics of changes accompanying ageing or induced by stress. International Journal of Andrology, 10(6): 809-828, 1987.
Johnson, L.A.; Weitze, K.F.; Fiser, P.; Maxwell, W.M.C. Storage of boar semen. Animal Reproduction Science, 62(1-3): 143-172, 2000.
Kang, S.; Pang, W.K.; Ryu, D.Y.; Song, W.H.; Rahman, M.S.; Park, Y.J.; Pang, M.G. Porcine seminal protein-I and II mRNA expression in boar spermatozoa is significantly correlated with fertility. Theriogenology, 138(1): 31-38, 2019.
Karageorgiou, M.A.; Tsousis, G.; Boscos, C.M.; Tzika, E.D.; Tassis, P.D.; Tsakmakidis, I.A. A comparative study of boar semen extenders with different proposed preservation times and their effect on semen quality and fertility. Acta Veterinaria Brno, 85(1): 23-31, 2016.
Martins, J.A.M.; Souza, C.E.A.; Silva, F.D.A.; Cadavid, V.G.; Nogueira, F.C.; Domont, G.B.; Oliveira, J.T.A.; Moura, A.A. Major heparin-binding proteins of the seminal plasma from Morada Nova rams. Small Ruminant Research, 113(1): 115–127, 2013.
Melo, L.M.; Teixeira, D.I.A.; Havet, A.; Cunha, R.M.S; Martins, D.B.G.; Castelletti, C.H.M; Souza, P.R.E.; Lima-Filho, J.L.; Freitas, V.J.F.; Cavada, B.S.; Rádis-Baptista, G. Buck (Capra hircus) genes encode new members of the spermadhesin family. Molecular Reproduction and Development, 75: 08-16, 2008.
Moura, A.A.; Koc, H.; Chapman, D.A.; Killian, G.J. Identification of proteins in the accessory sex gland fluid associated with fertility indexes of dairy bulls: a proteomic approach. Journal of Andrology, 27(2): 201–211, 2006.
Moura, A.A.; Chapman, D.A.; Koc, H.; Killian, G.J. A comprehensive proteomic analysis of the accessory sex gland fluid from mature Holstein bulls. Animal Reproduction Science, 98(3-4): 169-188, 2007.
Nesci, S.; Spinaci, M.; Galeati, G.; Nerozzi, C.; Pagliarani, A.; Algieri, C.; Tamanini, C.; Bucci, D. Sperm function and mitochondrial activity: An insight on boar sperm metabolism. Theriogenology, 144(1): 82-88, 2020.
Oungre, E.; Mortarino, M.; Negri, A.; Maffeo, G.; Ronchi, E. S. Purification and primary structure of a new bovine spermadhesin. European Journal of Biochemistry, 267(20): 6175-6179, 2000.
Reinert, M.; Calvete, J.J.; Sanz, L.; Mann, K.; Töpfer-Petersen, E. “Primary structure of stallion seminal plasma protein HSP-7, a zona-pellucida-binding protein of the Spermadhesin Family”. European Journal of Biochemistry, 242(3): 636-640, 1996.
Rozeboom, K.J.; Troedsson, M.H.T.; Hodson, H.H.; Shurson, G.C.; Crabo, B.G. The importance of seminal plasma on the fertility of subsequent artificial insemination in swine. Journal of Animal Science, 78: 443–448, 2000.
Roca, J.; Vazquez, J.M.; Gil, M.A.; Cuello, C.; Parrilla, I.; Martinez, E.A. Challenges in pig artificial insemination. Reproduction in Domestic Animals, 41(Suppl. 2): 43–53, 2006.
Santos, E.A.; Sousa, P.C.; Martins, J.A.; Moreira, R.A.; Monteiro-Moreira, A.C.; Moreno, F.B.; Oliveira, M.F.; Moura, A.A.; Silva, A.R. Protein profile of the seminal plasma of collared peccaries (Pecari tajacu Linnaeus, 1758). Reproduction, 147(6): 753–764, 2014.
Schober, D.; Aurich, C.; Nohl, H.; Gille, L. Influence of cryopreservation on mitochondrial functions in equine spermatozoa. Theriogenology, 68(5): 745-754, 2007.
Silva, E.F.; Cardoso, T.F.; Tavares, G.C.; Costa, V.G.G.; Silva, J.F.; Varela, A.S.JR.; Leite, F.P.L.; Corcini, C.D. Criopreservação de sêmen suíno e a pesquisa com antioxidantes. Revista Portuguesa de Ciências Veterinárias, 108(587-588): 103-112, 2013.
Van Tilburg, M.F.; Rodrigues, M.A.; Moreira, R.A.; Moreno, F.B.; Monteiro-Moreira, A.C.; Cândido, M.J.; Moura, A.A. Membrane-associated proteins of ejaculated sperm from morada nova rams. Theriogenology, 79(9): 1247–61, 2013.
Varela, P.F.; Romero, A.; Sanz, L.; Romão, M.J.; Töpfer-Petersen, E.; Calvete, E.J.J. The 2.4 a resolution crystal structure of boar seminal plasma psp-i/psp-ii: a zona pellucida-binding glycoprotein heterodimer of the Spermadhesin family built by a CUB domain architecture. Journal of Molecular Biology, 274(4): 635-649, 1997.
Yeste, M. State-of-the-art of boar sperm preservation in liquid and frozen state. Animal Reproduction, 14(1): 69-81, 2017.
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